创新论坛
第二组：生化与分子生物学
SRPK1促进非小细胞肺癌干细胞性增强
作者：梁瑾1 陈雨2 刘思英3 游墨晞3
深圳大学2013级临床医学；2.深圳大学2012级临床医学；3.深圳大学2014级临床医学
指导老师：巩丽云
学校：深圳大学 2013级 临床医学 城市：广东省深圳市 邮编：518000
目的：肺癌是最普遍的致死率较高的癌症之一。肺癌可分为小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC）,其中非小细胞肺癌约占患肺癌病人总数的75-80%[2]。有研究表明，抗凋亡性和放化疗的不敏感性是造成非小细胞肺癌病人生存率低的原因。据报道，在实体瘤中存在一少部分具有分化和增殖能力与肿瘤形成密切相关的肿瘤干细胞（CSC），肿瘤干细胞的研究对癌症的治疗具有重要的意义。
丝氨酸-精氨酸特异性的蛋白激酶1（SRPK1）是一种特异性磷酸化SR剪切因子的蛋白质。SR蛋白是一种富含丝氨酸和精氨酸的转录因子，它能够参与mRNA的剪接，与RNA的转录，染色体的重建，细胞周期循环，细胞结构重建和肿瘤有关。目前，有关SRPK1与癌症干细胞的研究国内还鲜有报道。
方法：1. Real-time PCR检测SRPK1在NSCLC中转录水平的表达情况；Western Blotting和免疫组织化学分析检测SRPK1在NSCLC中翻译水平的表达情况；统计学软件SPSS分析SRPK1的表达与NSCLC临床病理分级和病人预后及肺癌干细胞markers的相关性。2. 在A549，Calu-3细胞中构建过表达和低表达SRPK1稳定细胞株； real-time PCR检测构建的稳定细胞株中癌干细胞markers的转录水平的表达情况；侧群细胞检测实验检测稳定细胞株中侧群细胞的比例；干细胞成球实验检测SRPK1不同表达情况的稳定细胞株的癌干细胞性。3. 特定细胞皮下注射裸鼠，检测不同细胞浓度的成瘤情况；免疫组化分析小鼠的肿瘤情况。
结果：1. SRPK1在NSCLC的转录和翻译水平都高表达； SRPK1的表达情况与NSCLC的病理分级称正相关关系，分级越高，SRPK1的表达量越高；2．成功构建了SRPK1高低表达的稳定细胞株，在NSCLC细胞系中，SRPK1的表达情况与肺癌相关的癌干细胞markers的表达情况呈正相关性; SRPK1的表达情况与侧群细胞的比例呈正相关性；SRPK1的表达情况与肺癌细胞成球的能力呈正相关性。3. SRPK1高表达组的小鼠三个浓度都能形成肿瘤，并且SRPK1高表达的细胞组形成的肿瘤较大；SRPK1低表达组在注射1×102个细胞时未形成肿瘤，且较对照组形成的肿瘤小。
结论： SRPK1在NSCLC中高表达，与NSCLC病人预后有高度的相关性；SRPK1高表达能够促进NSCLC干细胞样表型增强，为NSCLC患者的治疗提供了一个新的思路和靶标。
关键词：SRPK1，NSCLC,癌干细胞样表型，侧群细胞
学生简介：梁瑾，深圳大学 2013级 临床医学（5年制）
陈雨，深圳大学 2012级 临床医学（5年制）
刘思英，游墨晞，深圳大学 2014级 临床医学（5年制）
导师简介：巩丽云，女，博士。深圳大学医学院生物化学和分子生物学教研室 副教授，硕士研究生导师, 美国国立癌症研究所（NCI）访问学者。主要从事癌基因在肿瘤发生发展过程中的信号转导通路的研究，研究成果作为第一作者分别发表在肿瘤学领域的权威期刊Clin Cancer Res（IF=7.78）和 Journal of Pathology（IF=7.79）。主持和参与多项国家自然科学基金。
