二、设计大赛

第一组：生理学，病生，药理，神经生物

探讨Gα_i和Gα_o蛋白在肥大细胞TLR2信号转导中的差异

作者：马强  林东旭  潘恩

 （深圳大学，2014级，临床医学）

        指导老师：余佯洋（深圳大学，518000）

立论依据Toll样受体(TLRs)家族是介导肥大细胞参与固有免疫的一类重要分子。TLR2分别与TLR1或TLR6形成TLR2/1和TLR2/6异二聚体，介导肥大细胞释放不同的炎症介质，具体机制未清。Gα_i/o蛋白参与TLR2介导的信号传导，但既往研究未能对Gα_o和Gα_i在其中行使的功能进行区分。课题组成员前期研究发现，Gα_o参与TLR2/1诱导肥大细胞释放白细胞介素-8（IL-8）的过程；Gα_i/o蛋白参与TLR2/6介导的信号传导，但不参与其引起的IL-8释放，提示TLR2/1和TLR2/6在肥大细胞信号传导中存在的差异与Gα_i和Gα_o的不同参与有关。

实验内容 选取人肥大细胞系LAD2细胞，构建Gα_i或Gα_o基因敲减的稳定细胞模型，不同配体分别激活TLR2/1、TLR2/6，使用荧光素酶报告系统和WB技术检测TLR2介导的下游信号通路的活化情况（包括丝裂原活化蛋白激酶即MAPKs、“钙离子−钙调磷酸酶−活化T细胞核因子即NFAT”通路、核因子κB即NF-κB和“磷脂酰肌醇3激酶−蛋白激酶B”通路）；使用ELISA试剂盒检测细胞介导炎症反应的能力；使用Trans-well系统检测细胞的趋化能力。材料 人肥大细胞系LAD2、ELISA试剂盒、荧光素酶试剂等。可行性 前期文献调研发现G蛋白在TLRs中的作用具有普遍性，但此前Gα_i和Gα_o亚蛋白在TLR2信号传导中的功能未见区分，且前期实验基础已很大程度支持本课题预期研究结果；课题组成员已经具备扎实的实验技能，实验室条件充足。创新性 明确区分Gα_i和Gα_o蛋白如何参与肥大细胞TLR2/1和TLR2/6异二聚体介导的信号传导。

学生简介：马强  林东旭  潘恩，深圳大学 2014级 临床医学（5年制）

导师简介：余佯洋，香港中文大学药理学博士学位，先后在深圳北京大学香港科技大学医学中心、中山眼科医院、深圳大学工作。

科研以病源微生物的重要受体Toll样受体及G蛋白在肥大细胞中的作用及其分子生物学机制的研究为主，并探讨TLRs信号通路与免疫性疾病的相关性。发表文章多篇，主持并参与多项科研项目。